Seroprevalence of arboviruses in Ecuador: Implications for improved surveillance / Seroprevalencia de arbovirus en Ecuador: implicaciones para mejorar su vigilancia

Abstract | Introduction: Arthropod-borne viruses (arboviruses) cause morbidity and mortality in humans and domestic animals worldwide. The percentage of population immunity or susceptibility to these viruses in Ecuador is unknown. Objectives: To investigate the proportion of Ecuadorian populations with IgG antibodies (Abs) (past exposure/immunity) and IgM Abs (current exposure) against flaviviruses and alphaviruses and to study the activity of these viruses in Ecuador. Materials and methods: During 2009-2011, we conducted a serosurvey for selected arboviruses in humans (n=1,842), equines (n=149), and sentinel hamsters (n=84) at two coastal locations and one in the Amazon basin (Eastern Ecuador) using enzyme-linked immunosorbent assay and hemagglutination inhibition test. Results: From 20.63% to 63.61% of humans showed IgG-antibodies for the flaviviruses: Dengue virus (DENV), yellow fever virus (YFV) Saint Louis encephalitis virus, and West Nile virus (WNV); from 4.67% to 8.63% showed IgG-Abs for the alphaviruses: Venezuelan equine encephalitis virus, eastern equine encephalitis virus, and western equine encephalitis virus. IgM-Abs were found for DENV and WNV. Equines and hamsters showed antibodies to alphaviruses in all locations; two hamsters seroconverted to YFV in the Amazonia. Conclusions: The results show a YFV vaccination history and suggest the activity of arboviruses not included in the current surveillance scheme. Enhanced arbovirus and mosquito surveillance, as well as continued YFV vaccination and evaluation of its coverage/ effectiveness, are recommended.

Resumen | Introducción. Los virus transmitidos por artrópodos (arbovirus) causan morbilidad y mortalidad en humanos y animales domésticos mundialmente. Se desconoce el porcentaje de inmunidad o vulnerabilidad de la población ecuatoriana ante estos virus. Objetivos. Investigar la proporción de poblaciones ecuatorianas con anticuerpos IgG (exposición o inmunidad pasada) y anticuerpos IgM (exposición reciente) contra flavivirus y alfavirus, e investigar su actividad en Ecuador. Materiales y métodos. Entre 2009 y 2011, se llevó a cabo una encuesta serológica para arbovirus en humanos (n=1.842), equinos (n=149) y hámsters centinela (n=84) en dos localidades costeras y en una en la Amazonía, utilizando la prueba ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) y la prueba de inhibición de la hemaglutinación. Resultados. Entre el 20,63 y el 63,61 % de los humanos registraron IgG contra el virus del dengue (DENV), el de la fiebre amarilla (YFV), el de la encefalitis de San Luis y el del Nilo Occidental (WNV); entre 4,67 y 8,63 % tenían IgG para los virus de la encefalitis equina venezolana, de la encefalitis equina del este y de la encefalitis equina del oeste. Se encontró IgM para DENV y WNV. En los equinos y en los hámsters se encontraron anticuerpos contra alfavirus en todas las localidades muestreadas; dos hámsters mostraron seroconversión a YFV en la Amazonía. Conclusiones. Los resultados del estudio evidenciaron los antecedentes de vacunación contra el YFV y sugieren la actividad de arbovirus no incluidos en el esquema de vigilancia actual. Se recomienda ampliar la vigilancia de arbovirus y mosquitos, continuar con la vacunación contra el YFV, y evaluar su cobertura y efectividad.

Prevalence of antibodies to equine alphaviruses in the State of Pará, Brazil / Prevalência de anticorpos para alphavirus em equinos do estado do Pará, Brasil

The State of Pará comprises 26% of Brazilian Amazon region, where a large diversity of arboviruses has been described. This study sought to assess the prevalence and distribution of hemagglutination inhibition (HI) antibodies against antigens of four alphaviruses (Togaviridae: Alphavirus ) from the species: Eastern equine encephalitis (EEEV), Western equine encephalitis (WEEV), Mayaro virus (MAYV), and Mucambo virus (MUCV) in 753 serum samples of horses in Pará State, Brazil. All investigated arboviruses were detected and indicate that horses are susceptible to these alphaviruses, and show evidences of their active circulation in farm animals in the Brazilian Amazon.(AU)

O estado do Pará corresponde a 26% da Amazônia brasileira, onde uma grande diversidade de arbovírus foi descrita. Este estudo procurou avaliar a prevalência e a distribuição de anticorpos inibidores da hemaglutinação (IH) contra antígenos de quatro alfavirus (Togaviridae: Alphavirus ), das espécies: Vírus da encefalite equina do leste (EEEV), Vírus da encefalite equina do oeste (WEEV), Vírus mayaro (MAYV) e Vírus mucambo (MUCV), de 753 amostras de soro de equinos no estado do Pará, Brasil. Todos os arbovirus pesquisados foram detectados, indicando que os equinos são suscetíveis a esses Alphavirus e mostrando evidências de sua circulação ativa em animais de fazenda na Amazônia brasileira.(AU)

Surto de encefalomielite equina Leste na Ilha de Marajó, Pará / Eastern equine encephalitis on Marajó Island, Pará state, Brazil

Nove casos de encefalomielite equina foram estudados na Ilha de Marajó, estado do Pará, Brasil. Os equinos apresentavam dificuldade em se manter em estação, andavam em círculo, tinham acentuada depressão, pálpebras cerradas, paralisia da língua, tremores musculares, bruxismo, anorexia e desidratação. Alguns apresentavam diminuição dos reflexos auricular, palpebral, de ameaça, diminuição do tônus da língua e taquicardia. Posição de auto-auscultação foi observada com frequência. Os animais muitas vezes eram encontrados apoiados em troncos e cercas para se manterem em estação. À necropsia verificou-se hemorragia das leptomeninges e da medula, alguns apresentaram ainda aderência das leptomeninges. À histopatologia verificou-se encefalite difusa que afetava principalmente a substância cinzenta, com meningite e coroidite. Foi observada perivasculite mononuclear. Em dois equinos identificou-se o vírus da encefalomielite equina Leste pela reação de Semi-Nested transcrição reversa de polimerase em cadeia (Semi-Nested RT-PCR).

Nine cases of equine encephalomyelitis on Marajó Island, state of Pará, Brazil, were studied. The affected horses had difficulty to stand, walked in circles, with marked depression, closed eyelids, tongue paralysis, muscle tremors, bruxism, anorexia and dehydration. Some had their ear and eyelid reflexes diminished, decreased tongue tone and tachycardia; laid down frequently they kept their head on the chest. Often they were seen resting their head on tree trunks or fences. At necropsy, hemorrhages of the meninges and spinal cord, and in some animals also adhesion of the meninges were found. Histologically there was diffuse encephalitis affecting mainly the gray matter, with meningitis and choroiditis. Presence of perivascular cuffs consisting of mononuclear inflammatory cells was observed. From two horses the Eastern equine encephalitis virus was identified by semi-nested reverse transcription polymerase chain reaction (semi-nested RT-PCR).

Enceflitis equina del este: cepas suramericanas I: preparación de una vacuna inactivada y su evaluación en animales de laboratorio / Eastern equine encephalitis: south american strains I: inactivated vaccine preparation and testing in small laboratory animals

En virtud de la ausencia de vacunas autóctonas contra el virus de encefalitis equina del Este (EEE) y el uso indiscriminado de vacunas importadas elaboradas con cepas que tienen un comportamiento antigénico, clínico, epidemiológico y molecular diferentes a las cepas aisladas en Venezuela, conllevó a la preparación de una vacuna con cepas autóctonas de EEE para la inmunización de équidos. En su producción se evaluaron tres cepas virales: El Delirio, La Trinidad y Tucacas. Los sustratos de producción empleados fueron: cerebro de ratón lactante (CRL), embriones de pollo (EP) y células VERO (CV). Se utilizaron dos inactivantes: Bromo - etilenimina (BEI) y Formaldehído. Una vez producido el virus, se determinó: la carga viral, el proceso de inactivación, así como la inocuidad y la potencia. Los resultados obtenidos indicaron efectividad en la replicación viral en todos los sustratos y cepas evaluados. La acción del BEI sobre la cepa El Delirio no funcionó, al no producirse inactivación completa del mismo. El formol inactivó el 100 por ciento de las cepas La Trinidad y Tucacas en CV, mientras que en EP, la inactivación fue del 33,3 por ciento. Las pruebas de inocuidad y potencia resultaron satisfactorias en el 100 por ciento de las vacunas producidas en CV. Estos resultados indican que el mejor sustrato para la elaboración de vacunas inactivadas son los cultivos celulares, al obtener una mayor masa antígena y una mejor eficiencia del inactivante. También se observó que los controles de inocuidad y potencia solo pudieron lograrse al obtener una inactivación del virus en un 100 por ciento

Prevalencia de anticuerpos VEE y EEE en población humana y equina de la selva peruana / Prevalence of antibodies VEE and EEE in human and equine population of the Peruvian jungle

El complejo de virus de encefalitis equina venezolana (VEE) esta integrado por los serotipos antigénicos 1AB, 1C,1D,1E de los cuales los únicos relacionados con epizootias son los serotipos 1 AB y IC. En el Perú el virus epizootico ha hecho su aparición esporádica desde la década de los 30, siendo la última incursión epizoodémica en el año 1973 por el serotipo 1AB. En Loreto, departamento de la Selva peruana, durante 1973 se identificó el serotipo 1D enzootico, asociado a cuadros febriles en humanos, sin embargo encuestas serológicas previas muestran anticuerpos VEE, entendiéndose que su presencia tiene una antigüedad pasada no determinada. El estudio tiene la finalidad de comparar la magnitud de la circulación de las cepas selváticas de la VEE en humanos y equinos, principalmente en las áreas tropicales donde hay una significativa población equina, considerándose este hecho de riesgo para la aparición de cepas epizooticas. Así mismo, se ha considerado también la encefalitis equina del Este (EEE), virus que ha causado epizootia equina en la selva y cuya participación en la patología humana aún no ha sido definida. Los resultados encontrados mediante prueba de neutralización en placa de VEE y EEE en células VERO con sueros humanos muestran una variada prevalencia. Siendo la mas alta para VEE en el departamento de San Martín 57 por ciento y EEE en el departamento de Loreto 62 por ciento y con relación a equinos VEE 68 por ciento y EEE 65 por ciento ambos en el departamento de Loreto.

The Venezuelan Encephalities virus (VEE) complex include 1AB, 1C, 1D, 1E serotypes, but the 1AB and IC serotypes are the only one related to epizooties. In Peru, the epizootic virus appeared in the 30th and the last appearance was in 1973 and the serotype isolated was 1AR. In Loreto in the Peruvian jungle was isolated VEE ID serotype from human febrile illness; however, previous surveillance founded VEE antibodies in the same area. In this study we want to know the prevalence of VEE and Eastern Equine Encephalities virus (EEE) antibodies in humans and equines for the jungle area where the equine population were increasing lately. U sing neutralization test by plaque reduction we founded a variety of prevalence. In the human sera the highest prevalence for VEE was 57% in San Martin and for EEE was 62% in Loreto. In equines sera the highest prevalence for VEE was 68% and for EEE was 65% in Loreto.

Identificaçäo do vírus causador da encefalomielite eqüina, Paraná, Brasil / Identification of the encephalitis equine virus, Brazil

Objetivo: No período de 1996 a 1999, um agente viral causador de encefalomielite afetou as populaçöes de eqüinos em diferentes regiöes do Estado do Paraná, Brasil. Objetivou-se realizar pesquisa sorológica na tentativa de isolar o vírus causador da doença. Métodos: Em quatro municípios do Estado do Paraná, Brasil, foram coletados culicídeos com armadilha Shannon e isca humana, identificados e processados para isolamento de vírus. Em dois municípios estudados foram colhidas amostras de sangue de eqüinos para isolamento de vírus e para pesquisa sorológica. Os soros foram analisados pelo teste de inibiçäo da hemaglutinaçäo frente a diferentes antígenos de Alphavirus e Flavivirus. Aqueles que revelaram reaçöes positivas-cruzadas foram analisados pelo teste de neutralizaçäo. Resultados: Foram coletados culicídeos dos gêneros: Culex, Aedes, Mansonia, Coquillettidia, Psorophora, Sabethes, Wyeomyia e Limatus. Embora näo sendo isolado o agente viral, foram detectados anticorpos hemaglutinantes para o vírus Encefalomielite eqüina do Leste, Mucambo, Pixuna, Maguari e St. Luis. Em doze amostras de soros foram detectados anticorpos neutralizantes para o vírus Encefalomielite eqüina do Leste. Conclusöes: Foram coletadas espécies de culicídeos, considerados na bibliografia como vetores de vírus causadores de encefalomielite buniavírus e outras arboviroses de importância epidemiológica. Pela presença de sintomas de encefalomielite e de anticorpos para o vírus Encefalomielite eqüina do Leste nos soros de cavalos, supöe-se ser esse o vírus causador da doença nos eqüinos das regiöes estudadas

Arboviruses Pathogenic for man in Brazil

Os mais importantes aspectos clinicicos e ecoepidemiologicos e aspectos preventivos acerca das arboviroses associadas com doenca humana no Brasil sao discutidos.Trinta e seis arbovirus dentre os tipos presentemente isolados no Pais tem sido incriminados como causadores de doenca humana. Destes, cinco sao importantes em termos de saude publica pois estao associados com epidemias , sao os virus Dengue (DEN), Mayaro(MAY), Oropouche (ORO), Rocio (ROC) e Febre amarela (FA). DEN e ORO estao associados com doenca humana epidemica em areas urbanas enquanto MAY, ROC e FA especialmente em areas rurais. Basicamente, o virus ORO determina um quadro febril algumas vezes acmpanhado por meningite asseptica. MAY e DEN sao responsaveis por quadros exantematicos, sendo que DEN, nos ultimos anos tem sido associado com quadros de febre hemorragica, o que sabidamente e o mecanismos pelo qual o virus FA determinaa sua apresentacao clinica classica e o ROC esta associado com graves quadros de encefalite. Trinta e um outros arbovirus tem sido associados com doenca febril benigna em poucos e esporadicos casos. Afora DEN e os Arenavirus Flexal e Sabia ( nao sao arbovirus), todos os arbovirus envolvidos com doenca humana na AmazoniaBrasileira, sao mantidos em natureza atraves de um ciclo silvestre desenvolvido na floresta, onde diversas especies de insetos hematofagos e vertebrados silvestres atuam como vetores e hospedeiros, respectivamente.O virus DEN tem um ciclo urbano em que o mosquito Aedes aegypti e o vetor e o homem atua como hospedeiro. Os arenavirus sao transmitidos diretamente ao homen atraves de excretas de roedores que sao seus principais hospedeiros.Excetuando os cinco virus associados com epidemias que causam um grande impacto socio-economico, inclusive levando a morte, casos verificados com FA, DEN e ROC, o verdadeiro papel dessesvirus como agentes sistematicos de doencas humanas e ainda puco conhecido. Novos estudos sao necessarios para esclarecer aspectos ainda obscuros acerca da epidemiologia da maioria desses arbovirus

Historical, epidemiological and ecological aspects of arboviruses in Argentina: Togaviridae, Alphavirus

This is a review of the arboviruses in Argentina belonging to families Flaviridae, Bunyaviridae and Rhabdoviridae. Of the many viruses belonging to these families, the flavivirus St. Louis encephalitis (SLE), has been most intensively studied. SLE virus strains have been recovered from three sources: 2 strains from humans with an undifferentiated, febrile disease; 6 from mosquitoes; and 2 from rodents. The viruses recovered from rodents are attenuated and those from mosquitoes are virulent based on a neuroinvasiveness test in mice; the degree of virulence of the mosquito strains remain to be analyzed. Serological surveys indicate a wide distribution and endemicity of SLE virus in the temperate and subtropical areas (central and northern Argentina), but no data are available from the andean region or from the South. The virulent SLE virus strains appear to be transmitted between Culex (Cx.)spp. from which they were isolated, and wild birds, based on antobody prevalence. A urban cycle may involve Cx. quinquefasciatus (source of a viral isolate and a competent experimental vector) and abundant birds (house sparrows, doves, and/or chickens), chickens are experimentally competent host species. Despite similarities in the ecology of SLE between Argentina and North America, urban outbreaks of SLE have not been recognized. Possible explanations for this discrepancy include virus strain differences in virulenc, ecologic factors determining the rate of virus transmission, and the lack of disease recognition and specific laboratory diagnosis of human meningoencephalitis. The transmission cycle of attenuated SLE virus strains isolated from rodentshas not been studied. Ilheus virus has isolated only once from a human being. The available serological data are difficult to interpret due to cross-reactivity with other flaviviruses, and the ecologyand medical importance of this agent remain uncertain. Dengue has not been recognized in Argentina since 1916, although is vector, Aedes aegypti, was not erradicated until 1963. Dengue was previously present in coastal localities of Chaco. Corrientes and Misiones Provinces. Within the last few years, Argentina was reinfested by Ae. aegypti. Although no human cases have vet been reported, outbreaks of dengue in bordering countries (Brazil, Paraguay, Bolivia) since 1986, cleary signal that the country in once againat risk of importantion ans spread of the virus

Utilización de las técnicas ELISA e inmunofluorescencia indirecta para la detección rápida de la encefalomielitis equina del este / Use of ELISA and indirect immunofluorescence techniques for the rapid detection of Eastern equine encephalomyelitis

Se muestran los resultados obtenidos de la utilización de un ElISA de doble anticuerpo y el método de inmunofluorescencia indirecta para la identificación de aislamientos del virus de la encefalomielitis equina del este realizados en los sitemas celulares Vero XL-1. Los resultados obtenidos mediante ambas técnicas fueron del 100 por ciento de coincidencia con la identificación por neutralización. Utilizando las primeras se pudo detectar el virus entre 6 y 8 horas posinoculación. Los resultados obtenidos utilizandon las células XL-2 fueron mejores que con las células Vero

Localized Eastern equine encephalitis in Santiago del Estero province, Argentina, without human infection

Se documenta una epizootia de encefalitis equina del este (EEE) localizada en una zona irrigada de cuatro departamentos de la Privincia de Santiago del Estero, Argentina, en 1981. La incidencia de casos equinos fue estimada en 17% con una tasa de casos fatales del 61% y una relación de infección inaparente: aparente de < ou = 2,9:1. El diagnóstico para el virus EEE fue confirmado por pruebas serológicas y no se encontró evidencia de casos por virus de las encefalitis del oeste o Venezuela. Esta es la primera epizootia circunscripta a una pequeña área geográfica que se ha definido en Argentina y la primera en que el virus EEE se ha encontrado como único arbovirus etiológico. Su reconocimiento brindo la posibilidad de buscar la infección humana, pero no se encontró clara evidencia de enfermedad o infección. Esto se atribuyó a la baja densidad de población humana rural, aunque no se descartaron otros factores ecológicos. La serología en otros animales no permitió determinar los huéspedes vertebrados y no se estudiaron los vectores por lo cual el ciclo de transmisión continúa desconocido, impidiendo especular sobre el riesgo potencial del virus EEE para el hombre en Argentina

Identificación de una cepa de encefalomielitis equina del este (EEE) aislada de una paloma Columba livia domestica / Identification of a strain of Eastern equine encephalomyelitis isolated from pigeon a Columba livia domestica

Se obtienen varias muestras durante un brote epizzótico en palomas Columba livia domestica ocurrido a finales de 1970 en la colina universitaria de la Ciudad de La Habana, de las cuales se lograron 2 aislamientos virales. En el presente trabajo se describe la metodología seguida para la identificación de uno de estos aislamientos, que fue identificado como una cepa del virus de la encefalomielitis equina del este (EEE). Se discuten varios aspectos ecológicos relacionados con el hecho de que otro aislamiento obtenido de las muestras del mismo brote fue identificado anteriormente como encefalitis equina del oeste (EEO)

Encefalitis equina del este en la Republica Dominicana, 1978. / Eastern equine encephalitis in Dominican Republic, 1978

En 1978, se presento en la Republica Dominicana un brote epizootico de EEE de proporciones aparentemente considerables. Este articulo describe las medidas tomadas para investigarlo y combatirlo